聚丙烯酰胺想必大家都有所了解,那你知道聚丙烯酰胺凝膠電泳是什么嗎?下面我們一起簡單了解下相關知識。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺單體和交聯劑甲叉雙丙烯酰胺在催化作用下形成的三維網狀結構物質。在不連續聚丙烯酰胺凝膠電泳中,凝膠的制作是分層進行的,因此凝膠不僅有分子篩效應,還具有濃縮效應;和瓊脂糖凝膠相比,聚丙烯酰胺凝膠難于制備和處理。它們的分離范圍較窄。但是它們也有突出的優點,由于是不連續的pH 梯度,故樣品被壓縮成一條狹窄的區帶,因而增強了分離效果,提高電泳分辨率。尤其對小DNA 片段的分析(5~500bp)。在這一范圍內,僅差1bp 的DNA 分子也能清晰地分開。其次,DNA 純度很高。在生產聚丙烯酰胺凝膠中得到的DNA 純度很高以致于下步操作不用任何處理。還有,它的負載容量高。該膠的標準加樣槽中可以加入高達10mL 的DNA 樣品,而不影響電泳分辨率。多應用于分離純化和鑒定大小為5~500bp 的DNA 片段。
聚丙烯酰胺凝膠電泳有連續與不連續體系兩種,前者指在整個電泳體系中的緩沖液pH 值和凝膠孔徑大小相同,主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白質樣品的分離,它除了電泳槽中的緩沖體系和pH 值與凝膠中不同外,凝膠本身也由緩沖體系、pH 值和凝膠孔徑不同的兩種凝膠堆積而成。簡單的說就是有正電向負電移動。增加電荷的生成、從而得到高分子聚合物。
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